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2025
9-24細(xì)胞輔助試劑在細(xì)胞培養(yǎng)、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用,它們能夠優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件、提高實(shí)驗(yàn)效率并確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。以下是一些常見(jiàn)的細(xì)胞輔助試劑及其應(yīng)用:一、細(xì)胞培養(yǎng)輔助試劑L-谷氨酰胺作用:細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)胞進(jìn)行能量生成以及蛋白質(zhì)和核酸合成所必需的一種營(yíng)養(yǎng)素。特性:不穩(wěn)定,在中性溶液中會(huì)自發(fā)降解,降解率隨保存溫度而變。降解后生成的副產(chǎn)物氨對(duì)干細(xì)胞、原代細(xì)胞等具有毒性。替代品:L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,其在水溶液中穩(wěn)定性高,可保持長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定的營(yíng)養(yǎng)供給,并降低分解產(chǎn)物造成的細(xì)胞毒性。胰...
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9-21在神經(jīng)科學(xué)的研究領(lǐng)域中,細(xì)胞模型的運(yùn)用為探索神經(jīng)系統(tǒng)的奧秘提供了關(guān)鍵支撐。BV2(小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞)作為其中備受矚目的一員,為科研人員深入了解神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制、攻克神經(jīng)疾病難題打開(kāi)了一扇重要的窗口。?從形態(tài)學(xué)特征來(lái)看,未受刺激的BV2細(xì)胞呈現(xiàn)類(lèi)阿米巴樣的肥大形態(tài),直徑范圍大致在10至15μm之間。有趣的是,與原代小膠質(zhì)細(xì)胞相比,這種形態(tài)暗示著B(niǎo)V2細(xì)胞處于一種高度活化和炎癥狀況。其生長(zhǎng)特性為半貼壁半懸浮,在培養(yǎng)過(guò)程中,懸浮的細(xì)胞可收集于培養(yǎng)管,貼壁細(xì)胞則需用PBS洗滌后,與解離液...
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9-14胎牛血清是從胎牛血液中分離純化得到的天然培養(yǎng)基添加劑,憑借營(yíng)養(yǎng)成分全面、促細(xì)胞生長(zhǎng)活性強(qiáng)、兼容性好等核心特點(diǎn),成為細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域重要的關(guān)鍵材料,廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究、疫苗生產(chǎn)、生物制藥等領(lǐng)域,為細(xì)胞的體外生長(zhǎng)與功能維持提供核心支撐。?營(yíng)養(yǎng)成分全面且天然適配細(xì)胞需求。胎牛血清富含蛋白質(zhì)(白蛋白、球蛋白等)、氨基酸、維生素、生長(zhǎng)因子(如表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子)、激素(胰島素、糖皮質(zhì)激素等)及礦物質(zhì)等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可全面滿(mǎn)足不同類(lèi)型細(xì)胞的代謝需求。其中,白蛋白能結(jié)合并運(yùn)輸...
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9-9Caco-2細(xì)胞是從人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞中分離建立的細(xì)胞系,憑借能分化形成小腸上皮樣結(jié)構(gòu)、具有腸道屏障功能與物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)特性等核心特點(diǎn),成為研究腸道吸收、藥物轉(zhuǎn)運(yùn)、腸道病理生理機(jī)制的理想模型,廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā)、營(yíng)養(yǎng)科學(xué)、腸道疾病研究等領(lǐng)域。?分化特性模擬小腸上皮結(jié)構(gòu)。Caco-2細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下(通常培養(yǎng)21-28天)可自發(fā)分化,形成與人體小腸上皮細(xì)胞相似的單層細(xì)胞結(jié)構(gòu),具有典型的微絨毛、緊密連接及細(xì)胞極性。分化后的細(xì)胞表達(dá)多種小腸上皮特異性標(biāo)志物,如刷狀緣酶(堿性磷酸酶、蔗糖...
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9-8胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛使用的天然培養(yǎng)基補(bǔ)充劑,其核心作用是為細(xì)胞提供生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子和激素,同時(shí)維持細(xì)胞形態(tài)、調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)并改善生存環(huán)境。胎牛血清的核心成分與功能:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含氨基酸、維生素、礦物質(zhì)、碳水化合物、脂類(lèi)等,為細(xì)胞提供基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)。示例:鈣元素促進(jìn)骨骼發(fā)育,維生素A保護(hù)視力,色氨酸改善睡眠質(zhì)量(需注意:這些作用基于血清成分的生理功能,但細(xì)胞培養(yǎng)中主要關(guān)注其營(yíng)養(yǎng)支持作用)。生長(zhǎng)因子與激素含表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、胰...
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9-4在探索人類(lèi)神經(jīng)系統(tǒng)奧秘與攻克相關(guān)疾病的征程中,合適的細(xì)胞模型至關(guān)重要。SH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)憑借其生物學(xué)特性和廣泛的應(yīng)用價(jià)值,成為神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域備受青睞的研究工具,為深入了解神經(jīng)細(xì)胞的生理病理機(jī)制、開(kāi)發(fā)新型治療手段提供了有力支撐。從培養(yǎng)條件來(lái)看,SH-SY5Y細(xì)胞通常使用RPMI1640培養(yǎng)基,并添加15%滅活FBS。培養(yǎng)環(huán)境要求嚴(yán)格,需維持在37℃、5%CO?的條件下,以確保細(xì)胞的正常生長(zhǎng)與代謝。傳代時(shí),一般采用1:3傳代,每4-7天進(jìn)行一次操作。值得注意的是,...
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8-29磷酸鹽緩沖液(PBS)是否需要稀釋以及稀釋到何種濃度,主要取決于具體實(shí)驗(yàn)需求。以下是不同場(chǎng)景下的稀釋建議及注意事項(xiàng):一、是否需要稀釋?zhuān)繜o(wú)需稀釋的場(chǎng)景細(xì)胞實(shí)驗(yàn):標(biāo)準(zhǔn)PBS(0.01M,pH7.4)可直接用于細(xì)胞洗滌、重懸或傳代培養(yǎng)。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn):如Westernblot、ELISA中樣本稀釋或洗滌,通常使用標(biāo)準(zhǔn)濃度。組織學(xué)處理:組織切片漂洗、抗原修復(fù)后洗滌等,標(biāo)準(zhǔn)濃度即可滿(mǎn)足需求。需要稀釋的場(chǎng)景高鹽敏感實(shí)驗(yàn):如某些蛋白質(zhì)透析或酶活性測(cè)定,需降低NaCl濃度(如稀釋至0.14M...
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8-26DMEM培養(yǎng)基制備與存儲(chǔ):制備步驟:稱(chēng)取DMEM粉末(高糖/低糖型),加入無(wú)菌容器。逐漸加入純水,攪拌至溶解(避免結(jié)塊)。添加L-谷氨酰胺(2mM)、L-丙酮酸鈉(110mg/L),混合均勻。用NaHCO?調(diào)節(jié)pH至7.2-7.4。通過(guò)0.22μm濾器過(guò)濾除菌。分裝至無(wú)菌容器,避免陽(yáng)光直射。存儲(chǔ)條件:短期使用:4℃保存(不超過(guò)1個(gè)月)。長(zhǎng)期保存:-20℃或更低溫度(防止成分降解)。注意事項(xiàng):所有操作需在無(wú)菌條件下進(jìn)行,防止污染。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整成分比例(如添加FBS至10%)...
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